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Introdução As análises bioquímicas realizadas ao humor vítreo constituem hoje uma mais valia para a toxicologia forense e em análises post-mortem ajudando a determinar a causa de morte e a estimar o intervalo post-mortem, assim como a elucidar casos forenses. O humor vítreo é uma substância gelatinosa contida na parte posterior do olho, constituído por 99% de água. Devido à sua composição e às suas características, é utilizado como matriz para diversas determinações analíticas post-mortem sendo considerada bastante útil em casos em que outros tipos de amostras não se encontram acessíveis, como é o caso do sangue ou da urina. Objetivo Os objetivos desta revisão consistiram em realizar um levantamento dos conhecimentos presentes na literatura relativos às análises post-mortem realizadas ao humor vítreo; comparar o tipo de análises realizadas ao humor vítreo em relação a outros fluidos corporais e; determinar para quais os analitos as quantificações poderão ou não ser vantajosas. Materiais e Métodos A pesquisa e recolha de informação foi realizada a partir de bases de dados como a PubMed, b-on e ResearchGate e a análise baseada em diversos artigos originais, de revisão e casos clínicos publicados entre 2000 e 2020. Discussão e Conclusão As determinações analíticas efetuadas ao humor vítreo post-mortem têm demonstrado inúmeras vantagens em toxicologia forense. Estudos realizados neste âmbito têm mostrado que através de uma abordagem mais detalhada será possível obter um maior conhecimento acerca do intervalo post-mortem, determinar causas de morte ou ainda, identificar marcadores associados a determinadas patologias oculares. Diversos desafios ainda existem relativamente à interpretação das concentrações no humor vítreo, técnicas de amostragem e redistribuição post-mortem dos compostos a analisar. Mais estudos devem ser desenvolvidos tendo em vista análises comparativas entre técnicas, analitos, fluidos corporais e outras variáveis que possam influenciar os resultados das determinações analíticas.